Sélection de souches hyperthermophiles productrices d’enzymes amylolytiques thermostables dans les sources hydrothermales

Abstract

Des souches hyperthermophiles se développant aux delà de 60°C ont été isolées à partir de trois sources hydrothermales algériennes, Hammam El-Bibane dans la wilaya de Bordj Bou Arreridj, Hammam Sillal et Hammam Kiria dans la wilaya de Bejaia. Les résultats des tests d'identification basés sur les caractères morphologiques, physiologiques et biochimiques indiquent que les souches semblent appartenir aux archaea hyperthermophiles. Les souches ont été criblées pour leur activité amylolytiques. La souche sélectionnée (HB) a été utilisée pour produire une amylase thermostable. Une amylase extracellulaire a été extraite à partir de 4 litres du milieu de culture inoculé par la souche (HB). La purification de cette enzyme a été réalisée par une précipitation au sulfate d'ammonium, une désionisation sur séphadex, G-25, une chromatographie échangeuse d'anion sur DEAE-cellulose et une chromatographie sur séphadex G-75. Le poids moléculaire de l'enzyme a été estimé à environ 43,72 kDa sur colonne chromatographique de type gel filtration G-75. L'effet de la température et du pH sur l'activité spécifique indique que l'enzyme se caractérise par une température optimale d'activité à 80°C et un pH optimum de 6. L'étude de la thermostabilité de l'enzyme indique qu'elle est thermostable et possède des temps de demi-vie de 57 minutes et 2,54 h à 90°C et 80°C, respectivement. Les ions Ca2+ stimulent légèrement l'activité enzymatique et L'addition de l'EDTA n'a aucun effet sur l'enzyme.