Etude Moléculaire du Cancer Colorectal

Abstract

Le cancer colorectal (CCR) est une maladie caractérisée par une grande hétérogénéité moléculaire, ce qui rend son diagnostic d'une importance capitale pour orienter les choix thérapeutiques ultérieurs. Dans cette étude, nous avons entrepris une analyse anatomopathologique des CCR visant à déterminer leurs types histologiques, leur s degré d'infiltration, ainsi que les facteurs histopronostiques essentiels pour la prise en charge médicale notamment la présence d'embo les vasculaires, d'engainements périnerveux et de métastases ganglionnaires. Par ailleurs, P armi les altérations moléculaires fréquemment observées dans les CCR s , les mutations du gène KRAS sont prédominantes, affectant environ 40 % des cas de CCR métastat ique (CCRm). Dans cette optique, nous avons réussi à extraire de l'ADN à partir d'échantillons de tissus FFPE , grâce à des optimisations minutieuses qui ont mis en évidence l'importance cruciale de la sélection précise de la zone tumorale lors des prélèv ements, de la réduction de la paraffine, ainsi que de l'utilisation appropriée de la protéinase K , en terme de concentrations, températures, et durées d'incubation. Par la suite, dans le cadre de la détection de ces mutations KRAS, nous avons réalisée une PCR pour assurer une amplification spécifique de la séquence de l'exon 2 du gène, connue pour être la région la plus fréquemment muté. Cependant les résultats de cette PCR se sont avérés non concluants , ce qui pourrait être expliqué par plusieurs hypothès es à savoir des concentrations inadéquates en amorces et en ADN, une éventuelle fragmentation de l’échantillon d’ADN, ainsi qu'un kit de PCR présentant des défaillances