Abstract:
Le cancer colorectal (CCR) est une maladie caractérisée par une grande hétérogénéité moléculaire, ce qui rend
son diagnostic d'une importance capitale pour orienter les choix thérapeutiques ultérieurs.
Dans cette
étude, nous avons entrepris une analyse anatomopathologique des CCR visant à déterminer leurs
types histologiques, leur
s
degré d'infiltration, ainsi que les facteurs histopronostiques essentiels pour la prise
en
charge médicale
notamment la présence d'embo
les vasculaires, d'engainements périnerveux et de métastases
ganglionnaires.
Par ailleurs,
P
armi les altérations moléculaires fréquemment observées dans les CCR
s
, les mutations du gène
KRAS sont prédominantes, affectant environ 40 % des cas de CCR métastat
ique (CCRm). Dans cette optique,
nous avons réussi à extraire de l'ADN à partir d'échantillons de tissus FFPE
,
grâce à des optimisations
minutieuses qui ont mis en évidence l'importance cruciale de la sélection précise de la zone tumorale lors des
prélèv
ements, de la réduction de la paraffine, ainsi que de l'utilisation appropriée de la protéinase K
,
en terme de
concentrations, températures, et durées d'incubation.
Par
la suite, dans le cadre de la détection de ces mutations KRAS, nous avons réalisée une
PCR pour assurer une
amplification spécifique de la séquence de l'exon 2 du gène, connue pour être la région la plus fréquemment
muté. Cependant les résultats de cette PCR se sont avérés non concluants
, ce qui pourrait
être
expliqué par
plusieurs
hypothès
es
à
savoir des concentrations inadéquates en amorces et en ADN, une éventuelle
fragmentation de l’échantillon d’ADN, ainsi qu'un kit de PCR présentant des défaillances
