Etude comparative de quelques méthodes d’analyse de la qualité du sperme bovin

Abstract

L’objectif du présent travail a été de comparer des méthodes d’analyse de la concentration et la mobilité de sperme épididymaire bovin et d’optimiser les protocoles pour leur utilisation au niveau local. Pour cela 12 testicules de taureaux ont été récupéré de l’abattoir et le sperme a été collecté par la méthode rétrograde-flushing. Le sperme collecté a été dilué 1:200 (v/v) avec l’eau distillée pour la mesure de la concentration à l’aide de l’hématimètre de Malassez et par spectrophotométrie (à  = 550 nm). Pour l’analyse de la mobilité, le sperme frais a été pré-dilué 1:20 avec de la solution saline puis co-incubé (1 :1,35 v/v) avec du plasma prélevé de vache préalablement dilué 1 :10 (v/v) pour stimuler la mobilité. Cette dernière a été évaluée par spectrophotométrie et par analyseur informatique (CASA). Pour l’analyse de la concentration, la comparaison entre la méthode hématimétrique qui représente la méthode de référence par excellence et la méthode spectrophotométrique a révélé que cette dernière représente une alternative (puisque les résultats des 2 méthodes sont très corrélés avec r = 0.87) plus rapide et plus sensible grâce à sa capacité à détecter des variations minimes de concentration. Cependant, les valeurs obtenues par cette méthodes ont une plus grande variabilité (CV = 35% vs 8.45 %) et cette méthode a, quasi systématiquement surévalué les concentrations des échantillons. Pour la mobilité, on a notamment remarqué une corrélation positive et assez importante (r = 0.84) entre le % de spermatozoïdes mobiles et l’absorbance à λ = 550 nm. On a également constaté que la sous-population de spermatozoïdes mobiles la plus corrélée à l’absorbance a été les spermatozoïdes rapides.et on a a révélé que c’est l’amplitude de déplacement latéral de la tête (ALH) et la vitesse curvilinéaire (VCL) qui sont les paramètres les plus détectés par la spectrophotométrie. La spectrophotométrie peut constituer une méthode alternative assez fiable pour mesurer la concentration des spermatozoïdes notamment lorsque le nombre d’échantillons est élevé mais, pour la mobilité, elle ne fournit qu’un aperçu sur la mobilité globale et sur le % de spermatozoïdes rapides notamment les non progressifs.