Optimisation des conditions d’extraction des composés phénoliques et la détermination de l’activité antioxydante et antimicrobienne des extraits des feuilles de Crataegus monogyna.

Abstract

Le but de ce travail est d’optimiser l’extraction des composés phénoliques et de l’activité antioxydante des feuilles de Crataegus monogyna, en utilisant une méthode d’extraction assistée par ultrasons combinée à la méthodologie de surface de réponse (RSM). Afin de déterminer les bornes inférieures et supérieures des variables indépendantes une étude préliminaire a été effectuée. Trois variables indépendantes ont été testées : la température (45, 50 et 55°C), la concentration en éthanol (0, 50 et 100 %) et le temps d’extraction (5, 30 et 55 min). Trois réponses la teneur en polyphénols totaux (TPT), le piégeage des radicaux libres DPPH et ABTS ont été déterminées. Par ailleurs, les taux d’humidité, de cendres et la teneur en caroténoïdes ont été déterminés. L’activité antimicrobienne de l’extrait de C. monogyna obtenu dans les conditions optimales d’extraction a été étudiée sur quatre bactéries : Escherichia coli (ATCC 25922), Staphylococcus aureus (ATCC 6538), Salmonella enterica (Clinical strain), Enterococcus faecalis (ATCC 29212) et une levure Candida albicans (Laboratory strain) avec la méthode de diffusion sur gélose Mueller Hinton, ainsi sept concentrations de 10 à 120 µg/ml de l’extrait ont été utilisées pour la détermination des concentrations minimales inhibitrices (CMI) des souches sensibles. Le taux d’humidité, de centres et la teneur en caroténoïdes des feuilles de C. monogyna obtenus sont 39,64±1,47% ; 7,65 ± 0,28 % et 14,08 ± 2,01 mg de β-carotène/g MS, respectivement. L’optimisation des réponses des surfaces multiples des extraits de C. monogyna a permis d’obtenir les conditions optimales d’extraction suivantes : 52,44 °C, 45,40 min et 62,16 % en éthanol. Ces paramètres ont permis d’obtenir des TPT de 115,07 mg EAG/g MS ; un effet de piégeage du radical libre DPPH de 225,19 µg EAG/ml et un effet de piégeage du radical cationique ABTS de 84,59 mmol ET/g MS. L’extrait de C. monogyna montre un faible effet antibactérien sur toutes les souches testées avec des diamètres des zones d’inhibition allant de 11 à 13 mm. En revanche, Enterococcus faecalis n’a montré aucune sensibilité vis-à-vis de l’extrait testé. Une CMI de 60 µg /ml a été obtenue sur les deux souches E. coli et S. aureus. Alors qu’une CMI de 120 µg /ml a été obtenue dans le cas de C. albicans. Par ailleurs, les CMIs obtenues indiquent un effet bactériostatique et fongistatique.