Abstract:
L'intégrité du génome est essentielle pour assurer la transmission fidèle de l'information
génétique lors de la réplication de l'ADN. Cependant, l'ADN est constamment exposé à des lésions
pouvant altérer sa structure et son fonctionnement. Ces lésions peuvent être causées par différents
facteurs biotiques et abiotiques. La formation de lésions de l'ADN peut entraîner des erreurs de
réplication, des cassures double-brin et d'autres altérations qui compromettent la stabilité et l'intégrité
du génome.
Pour faire face à ces lésions, les cellules activent une réponse cellulaire appelée Réponse aux
dommages de l'ADN (DDR). L'équipe Dynamique des Chromosomes, au sein de laquelle s'est déroulé
mon stage, s'est intéressée à la compréhension du mécanisme de réponse au stress réplicatif. Ils ont
identifié une protéine appelée LUMINIDEPENDENS (LD) comme un nouvel acteur potentiel dans cette
voie. Cependant, le rôle précis de LD dans la réponse au stress réplicatif demeure encore mystérieux.
Pour mieux comprendre le mécanisme moléculaire impliquant LD, l'équipe a réalisé une
expérience d'immuno-précipitation en présence d'hydroxy-urée. Ils ont identifié les protéines qui
interagissent avec LD en utilisant la spectrométrie de masse. Les résultats obtenus ont révélé que LD
interagit avec plusieurs protéines, dont quatre appartenant au complexe de réplication A (RPA). Ce
complexe joue un rôle essentiel dans la réplication, la réparation et la signalisation des dommages de
l'ADN. Les interactions entre LD et les différentes sous-unités de RPA ont été confirmées à l'aide de la
technique de complémentation par fluorescence biomoléculaire (BiFC), qui permet de visualiser les
interactions protéine-protéine. Plus spécifiquement, on a pu observer des interactions entre LD et
RPA2B ainsi qu'entre LD et RPA1C. Nos résultats, même s’ils restent à confirmer, suggèrent que la
protéine LD interagit bien avec les protéines RPA.
