Analyse de la réponse des plantes au stress réplicatif : Etude de l’interaction de la protéine LUMINIDEPENDENS (LD) avec les protéines RPA.

Abstract

L'intégrité du génome est essentielle pour assurer la transmission fidèle de l'information génétique lors de la réplication de l'ADN. Cependant, l'ADN est constamment exposé à des lésions pouvant altérer sa structure et son fonctionnement. Ces lésions peuvent être causées par différents facteurs biotiques et abiotiques. La formation de lésions de l'ADN peut entraîner des erreurs de réplication, des cassures double-brin et d'autres altérations qui compromettent la stabilité et l'intégrité du génome. Pour faire face à ces lésions, les cellules activent une réponse cellulaire appelée Réponse aux dommages de l'ADN (DDR). L'équipe Dynamique des Chromosomes, au sein de laquelle s'est déroulé mon stage, s'est intéressée à la compréhension du mécanisme de réponse au stress réplicatif. Ils ont identifié une protéine appelée LUMINIDEPENDENS (LD) comme un nouvel acteur potentiel dans cette voie. Cependant, le rôle précis de LD dans la réponse au stress réplicatif demeure encore mystérieux. Pour mieux comprendre le mécanisme moléculaire impliquant LD, l'équipe a réalisé une expérience d'immuno-précipitation en présence d'hydroxy-urée. Ils ont identifié les protéines qui interagissent avec LD en utilisant la spectrométrie de masse. Les résultats obtenus ont révélé que LD interagit avec plusieurs protéines, dont quatre appartenant au complexe de réplication A (RPA). Ce complexe joue un rôle essentiel dans la réplication, la réparation et la signalisation des dommages de l'ADN. Les interactions entre LD et les différentes sous-unités de RPA ont été confirmées à l'aide de la technique de complémentation par fluorescence biomoléculaire (BiFC), qui permet de visualiser les interactions protéine-protéine. Plus spécifiquement, on a pu observer des interactions entre LD et RPA2B ainsi qu'entre LD et RPA1C. Nos résultats, même s’ils restent à confirmer, suggèrent que la protéine LD interagit bien avec les protéines RPA.